支链淀粉检测试剂盒库号M248897

支链淀粉检测试剂盒库号M248897支链淀粉检测试剂盒库号M248897详细信息
前言:

谷类淀粉的许多特性决定其终用途，这些取决于直链淀粉/支链淀粉的比率。这些特性包括糊化和凝胶化，溶解度，抗性淀粉的形成以及整颗大米的烹饪和构造特性。因此，淀粉中直链淀粉含量的测定是淀粉加工的一个重要的质量参数。

常用的测定谷物淀粉中直链淀粉含量的方法是利用电势，电流测定或直链淀粉的碘结合能力比色测定直链淀粉-碘色合配合物。然而，这些方法具有不确定性。支链淀粉-碘复合物也可以形成，这样降低了利用非比色法测定的游离碘离子的浓度，并且用比色法测量时，该复合物可能和直链淀粉-碘复合物吸收相同波长的光。这种复合物致使直链淀粉的测定含量过实际含量，需要进行校正。Gibson等详细列举了使用这些方法所遇到的许多其他问题。

支链淀粉结合ConA的特殊复合物为淀粉中直链淀粉的测定提供了一种替代方法，而且不存在不确定性问题。在pH值，温度和离子强度的条件下，ConA特异性结合分支多糖并形成沉淀，这种结合以多个非还原性末端基团上的α-D-吡喃葡萄糖基或α-D-吡喃甘露糖基单位为基础。因此，ConA可以结合淀粉中的支链淀粉成分，但是不能结合线性为主的直链淀粉成分。

此方法是Yun和Matheson改进的ConA方法。分析之前用乙醇预处理去除脂质。 

原理：

淀粉样品通过加热完地溶解在二甲基亚砜（DMSO）里。用乙醇沉淀淀粉去除其中的脂质，回收沉淀的淀粉。用醋酸/盐溶液溶解沉淀的样品，加入ConA，特异性沉淀支链淀粉，离去除沉淀。单位体积上清液中的直链淀粉用酶水解为D-葡萄糖，然后用葡萄糖氧化酶/过氧化物酶试剂进行测定。另外一份单位体积醋酸/盐溶液中的总淀粉同样用酶水解为D-葡萄糖，然后加入葡萄糖氧化酶/过氧化物酶，用比色法测定。

根据ConA沉淀样品的上清液和与总淀粉样品中的GOPOD在510 nm处的吸光光度值之比判断直链淀粉在总淀粉中的含量。

该方法适用于所有的纯淀粉和谷物粉。

精确性 

样品如为纯淀粉，相对标准偏差为<5%。

样品如为谷物面粉，相对标准偏差为～10%。

试剂盒：

瓶子1：冻干的Con A （伴刀豆球蛋白 A concanavalin A) ，200 mg，-20℃下稳定性>5年。

瓶子2：淀粉葡糖苷酶【200U，条件为消化对硝基苯基β-麦芽糖苷（也是3300U，条件为pH4.5，40℃下消化淀粉）】加上真菌α-淀粉酶（500U ，条件为pH5.0，40℃下消化 Ceralpha 试剂），2mL，4℃下稳定性>5年。

瓶子3：GOPOD 试剂缓冲液。磷酸钾缓冲液（1M，pH7.4），对羟苯甲酸（0.22M）（0.02% W/W）。4℃下稳定性> 3年。

瓶子4：GOPOD试剂酶。葡糖氧化酶（>12,000U）加上过氧化物酶（>650U）和4-氨基安替比林（80mg）。冻干粉，-20℃下稳定性>5年。

瓶子5：D-葡萄糖标准溶液（5 mL,1.0mg/mL）溶于苯甲酸0.2%（w/v）。室温下稳定性>5年。

瓶子6：淀粉参考样品（含有特定含量的直链淀粉），室温下稳定性>5年。