淀粉总量检测试剂盒库号：M189312淀粉总量检测试剂盒库号：M189312 爱尔兰Megazyme淀粉总量检测试剂盒型号:K-TSTA 库号：M189312 查看hh 淀粉测定方法可以分为酸水解法和酶法分析法。酸水解只能应用于纯淀粉样品。酶法分析方法在前处理步骤，淀粉凝胶化，液化和糊化，糊精水解成葡萄糖，葡萄糖测定步骤等方面存在不同。AACC法76-11详细描述了淀粉在高压蒸汽灭菌锅中及含水的条件下凝胶化，并用淀粉葡糖苷酶将淀粉转化为葡萄糖，再测定葡萄糖含量。AACC法76-11使很多样品和材料的淀粉含量被低估，这些样品包括高直链淀粉玉米淀粉和许多加工过得谷物制品。目前，很多方法在淀粉凝胶化的过程中后立即结束后加入耐热α-淀粉酶处理。对于难以凝胶化的样品如高直链淀粉玉米淀粉，采用氢氧化钠或DMSO。在膳食纤维的测定方法中为取保淀粉完溶解，Englyst和Cumming（1988）加入了淀粉脱支化酶，普鲁兰酶。为了满足样品中总淀粉含量的定量测定的需要，Megazyme公司研发了一种使用耐热α-淀粉酶和淀粉葡糖苷酶的淀粉总量试剂盒。这个方法已被AOAC和AACC采用。近来，我们改进了方法，使耐热α-淀粉酶和淀粉葡糖苷酶孵育过程可以相同的pH(pH 5.0)下进行，可样简化了测定步骤，并将麦芽***糖生成的可能性降到低。Megazyme淀粉总量试剂盒可测定大部分食品，饲料，植物和谷物制品（天然或加工过的）。对于大部分样品（如小麦粉），淀粉在样品孵育中（大约100℃，并加入耐热α-淀粉酶）完溶解。含有大量抗性淀粉的样品（如高直链淀粉玉米淀粉），需要用2M KOH或热DMSO进行预溶解。含有可溶性淀粉或麦芽糊精的样品，不需要用耐热α-淀粉酶处理。原理：耐热α-淀粉酶水解淀粉为可溶性分支和无支的麦芽糊精（1）如有必要，样品中的抗性淀粉可加入4℃的2M KOH并搅拌进行预溶解，并用醋酸钠缓冲液中和，再用α-淀粉酶处理（2）。也可用100℃的DMSO溶解。淀粉葡糖苷酶（AMG）定量水解麦芽糊精成D-葡萄糖（3）D-葡萄糖被氧化成D-葡萄酸盐，并释放一摩尔H2O2，再通过过氧化物酶比色测定H2O2含量并产生昆亚胺染料。样品中还有高含量的D-葡萄糖和麦芽糊精可在测定前用含水乙醇（80% v）。一个样品可以在70分钟完成。24个样品可以在2小时内完成。特异性，灵敏度，线性范围和精确性这个分析可用于测定α-葡聚糖（包括淀粉，糖原，植物糖原和非抗性麦芽糊精）。小吸光度差异为0.10吸光度单位。这相当于当样品体积为1.00 mL时，1.0 mg D-葡萄糖（或0.9 mg 淀粉）/样品溶液L。检测限为2.0 mg D-葡萄糖（1.8 mg淀粉）/L，这是在0.020的吸光度单位差异，大样品体积为1.00 mL得到的。检测的线性范围为5-100 ug D-葡萄糖，同一样品分别进行两次测定,其吸光度值会有0.005-0.010吸光度单位的变化，这相当于样品体积为1.00 mL时，样品溶液中D-葡萄糖浓度0.05-1.0 mg/L。如果样品是经过稀释的，在计算结果时候需要乘以相应的稀释系数(F)，如果在样品制备阶段，样品是被称量的，如10g/L，可能会产生0.02 到 0.05 g/100 g的差异。干扰：如果在实验规定的时间内(大约5分钟)完成D-葡萄糖转化过程,通常认为没有干扰发生。这个也可以进一步验证，通过在实验的完成时，向比色皿中加入D-葡萄糖(0.1mL中加入50 ug)，吸光光度值有会明显增加。通过加入内标物可以对样品中的干扰物质进行鉴定。定量回收试验:通过向样品中添加内标物,计算样品在处理和提取时的损失。如:在初的提取步骤时加入D-葡萄糖 |
